（本文作者:南京工业大学制药与生命科学院 程霞等）
　　1 基源
　　断血流(Herba Clinopodii)最初是从安徽省发掘出来的民间使用的草药。其入药商品为唇形科植物风轮菜Clinopodi-um chenensis (B enth. ) O. Kuntze与多头风轮菜(荫风轮) Cli-nopodium polycephalum (Vaniot) C. Y. W u et Hsuan的干燥地上部分。风轮菜始载于明《救荒本草》(1406年),荫风轮始载于《植物名实图考》(1848年) ,风轮菜分布于浙江、江西、福建、广东、广西、贵州等地;荫风轮主要分布于江苏、安徽、广西、贵州、云南、四川等地。2005版药典一部收载的断血流即为上述二种原植物。

　　2 化学成分及有效成分的提取与分离
　　中药断血流的药用植物风轮菜和荫风轮中,含有皂苷类、黄酮类、氨基酸类、多糖类、酚性物质和挥发油等化合物,其中皂苷类和黄酮类化合物为断血流止血、抗炎的有效成分。

　　2.1 化学成分
　　2.1.1 黄酮类　已从风轮菜中分离出多种黄酮类化合物。包括香蜂草苷(dydimin)、橙皮苷( hesperidin)、异樱花索-7-芸香糖苷(isosakuranetin-7-rutinoside) 、芹菜素( ap igenin) 、洋芹素(1elereoin) 、柚皮素272芸香苷( nairutin) 和江户樱花苷(p runin)。
　　2.1.2 皂苷类　从风轮菜中分离得到了风轮菜皂苷(clinop-odiside)B、C、D、E、F、G,从荫风轮中分离出风轮菜皂苷(clinopodiside)A。
　　2.1.3 挥发油　荫风轮中挥发油成分约占0.13%,文献报道的已鉴定出的挥发油成分有44种,主要是反式石竹烯、柠檬烯和匙叶桉油烯醇等。
　　2.1.4 其他成分　除上述成分外,从风轮菜中还分离出了β-谷甾醇、氨基酸、香豆精和鞣质等成分;从荫风轮中还分离出香豆酸、树脂、蛋白质等成分。

　　2.2 有效成分的提取与分离
　　2.2.1 风轮菜皂苷A的提取分离纯化-乙醇回流柱层析法　风轮菜干燥全草粗粉,80%乙醇(EtOH)回流提取,提取液减压回收EtOH至干,得浸膏。(10 kg粗粉∶1. 2 kg浸膏) ,转溶于50℃热水中,过滤,水溶液用EtOAc提尽黄酮类成分,继用水饱和得n2BuOH萃取,合并n-BuOH萃取液,减压回收溶剂,得浸膏10.8g,将10.8g浸膏进行低压柱层析(硅胶H500g), CHCl3-MeOH-H2O (7∶3∶0.3)洗脱,每份收集100ml,薄层检测,20～28份合并,用硅胶H200g再进行常压柱层析,CHCl3-2EtOAc2MeOH (2∶1∶2)洗脱得粗皂苷,MeOH重结晶得风轮菜皂苷A(10 kg粗粉∶600 mg皂苷A) 。
　　2.2.2 大孔吸附树脂纯化断血流总皂苷　该方法是将断血流粉末通过乙醇回流,得断血流总皂苷提取液,回收乙醇,加水溶解后用水饱和的醋酸乙酯萃取,取含断血流总皂苷的水层溶液用D101大孔吸附树脂进行富集、纯化断血流总皂苷。洗脱时,用蒸馏水、30%乙醇、70%乙醇各以3BV (BV为柱床沉降体积)以1BV /h的速度依次洗脱,收集70%乙醇洗脱部位, 70%乙醇洗脱部位总皂苷洗脱率为86.8%。本法具有较好的纯化效果。

　　3 断血流的质量控制
　　随着对断血流活性成分研究的不断深入,用于鉴别和测定其含量的方法也有了较大的提高。最初报道的是采用分光光度法测定断血流皂苷的含量,目前2005版《中国药典》中,断血流鉴别项下规定的是采用薄层色谱法用醉鱼草皂苷Ⅳb(曾用名:断血流皂苷A)作为对照品,进行有效成分的鉴定。

　　3.1 断血流制剂质量控制　针对断血流不同剂型,包括片剂、颗粒剂、口服液、胶囊等,均有采用HPLC法进行含量测定的研究报道,其色谱条件、对照品、供试品溶液准备及测定方法基本与2005版《中国药典》中断血流片项下含量测定相同

　　3.2 断血流原药材的质量控制　梁爱君等选择断血流皂苷A作为指标成分,采用反相高效液相色谱法(HPLC),首次对断血流药材进行了含量测定,本法色谱柱为D ISCOVERYC18 (4.6mm×250mm×5μm),流动相为甲醇2水(73∶27),流速0.8ml·min- 1,检测波长250nm。结果断血流皂苷A在15.0～39.0 mm·L-1范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.5%,RSD为1.3% (n=9) 。该试验结果表明,HPLC法测定断血流皂苷A含量的方法简便、灵敏、重现性好。2005版《中国药典》中,断血流项下没有含量测定项。为使其质量标准更加科学可靠,有必要为原药材建立含量测定指标,并依此更好地控制原药材的质量。本法实测得断血流皂苷A在断血流药材干品中的含量约为0.03%～0.07%,已超过万分之一,按国家食品药品监督管理局的新药质量标准研究技术要求,此成分可独立作为含量测定指标。

　　4 药理作用
　　4.1　一般药理学试验研究　彭代银等进行了断血流皂苷的一般药理学研究,其目的是为了进一步探讨断血流在药用基础上的安全性。该研究结果表明,在药效剂量下断血流总苷对大鼠、小鼠的神经系统,家猫的呼吸系统及狗的心血管系统均无明显影响,体现了本品有较高的安全性。在子宫活动试验中发现,断血流皂苷对正常子宫有兴奋作用,但这一作用有利于止血药效发挥。

　　4.2 药效
　　4.2.1 止血作用　断血流的止血作用主要表现在直接(创伤)止血、间接促进凝血、收缩血管三个方面。
　　(1)家兔颈动脉切口、股动脉切口,家兔肝脏、后肢皮肤、肌肉切割,外敷断血流粉,止血作用均强于淀粉P<0.01,止血时间均比云南白药明显缩短(P<0.01) 。
　　(2)对进行了6d断血流醇提液灌胃的小鼠进行断尾出血时间、出血量和凝血时间测定(毛细玻璃管法)试验。结果经方差分析,断血流缩短出血时间、减少出血量比生理盐水(阴性对比)作用明显(P<0.01),断血流缩短出血时间、减少出血量与云南白药(阳性对比)相比差异无显著性(P<0.01),而凝血时间试验表明断血流与生理盐水组的凝血时间差异无显著性(P<0.05),凝血时间分别为:生理盐水183.0±57.35s,云南白药126.0±46.7s,断血流为165.0±51. 47s。此结果提示断血流的止血作用不在于促进凝血。但有相反结果文献报道,断血流总苷剂量20mg·kg-1和大剂量40 mg·kg-1(相当临床试用量按体重计6.67倍和13.33倍)用于小鼠,可明显缩短小鼠断尾出血时间,减少出血量,并缩短凝血时间。家兔大剂量10mg·kg-1和中剂量5mg·kg- 1(相当临床试用量3.34倍和1.67倍)可使血浆复钙凝血时间(PRT)缩短;10 mg·kg-1也可明显缩短凝血酶原时间(SPT)和白陶土部分凝血活酶时间(KPTT),但对大鼠优球蛋白溶解时间无明显影响,表明本品可通过激活凝血系统,促进纤维蛋白形成而凝血,从而发挥止血药效。
　　(3)取家兔8只,用断血流醇提物20%水溶液进行离体兔耳血管灌流法试验,每次给药0.5ml,测定20min内血流量变化,与给药前比较。结果经F检验,风轮菜可使灌流量明显减少,取大鼠24只分成4组,断血流醇提物配成0.8%水溶液进行大鼠在体肾脏灌流试验,每次给药0.1ml,观察给药前后灌流压差值和灌流压提高值。结果经F检验,风轮菜明显提高灌流压,给药前后灌流压差值为78.66±13.04 mmHg,流量压提高118.4%。此实验结果提示风轮菜止血作用主要在于收缩血管。刘青云等研究发现醇提风轮菜提取物能比水提物更好的提高家兔离体胸主动脉、肺主动脉、子宫动脉、肾动脉、门静脉等血管的收缩力,其中对子宫动脉作用最强,其次为肾动脉、胸主动脉、肺主动脉。起作用于去甲肾上腺素比,作用缓慢,温和而持久,硝普钠可拮抗风轮菜提取物的收缩血管作用。
　　4.2.2 抗菌作用　采用平皿稀释法,对风轮菜和荫风轮进行不同浓度抗菌作用测定,培养观察48h,结果显示风轮菜和荫风轮的水提取液对金色葡萄球菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌、大肠杆菌有一定的抑制作用,且最小抑菌浓度为1∶10～1∶20。
　　4.2.3 抗炎及免疫作用　荫风轮总皂苷对大鼠足趾肿胀、大鼠炎性肉芽肿、小鼠皮肤及腹腔毛细血管通透性增高有抑制作用,并可兴奋大鼠肾上腺皮质,表现出抗炎作用。荫风轮总皂苷能抑制巨噬细胞吞噬功能,升高小鼠血清IgG水平、降低血清补体总量。荫风轮浸膏对大鼠蛋白性关节肿、甲醛性关节肿、小鼠耳壳炎症、毛细血管通透性增高有明显抑制作用。
　　4.2.4 缩子宫作用　断血流总苷浓度0.075、0.15 g·L-1可显著提高离体大鼠子宫收缩幅度,10、5、2.5 mg·kg- 1可使家兔在体子宫收缩幅度增加,并增加子宫活动力。由于子宫收缩,可压迫子宫血管,利于子宫血管闭合。此作用可能是断血流总苷对子宫异常出血疗效显著的因素之一。
　　4.2.5 抗辐射作用　小鼠灌胃荫风轮浸膏1.2g·kg- 1可明显提高钴60照射后的存活率。

　　4.3 毒性作用　荫风轮、风轮菜用体积分数为75%的乙醇提取,提取物配成体积分数为50%的水溶液,其LD50>20g·kg-1。风轮菜、荫风轮用体积分数为27%的乙醇提取。提取物配成体积分数为50% 的水溶液,可使家兔耳出现红肿、坏死等现象,但短时间内即可恢复正常。小鼠灌胃风轮菜及荫风轮用体积分数为27%的乙醇提取,提取物配成体积分数为50%的水溶液。其LD50均大于20g·kg-1。小鼠灌胃给予不同剂量的断血流浸膏,其LD50为(14.6±2.4)g·kg-1。0.6g·kg-1断血流浸膏对小鼠的发育有一定促进作用,而3.6g·kg-断血流浸膏则对小鼠的发育有一定的抑制作用,但无明显差异,且断血流浸膏对小鼠的血象及肝肾功能无明显不良影响。剂量在20～100mg·kg-1内的断血流浸膏不会影响家兔心电图波形及心电传导时间,只有超过120 mg·kg-1时,才会产生致命的影响。断血流浸膏对家兔血压也有相似的作用。

　　5 临床应用
　　断血流为70年代从民间验方筛选,经临床验证后被国家药典录入的少数几个单味药之一,其疗效确切,安全性高,被公认为中医临床首选口服妇科止血药。临床上断血流制剂广泛用于治疗各种出血、单纯性紫癜、原发性血小板减少性紫癜等症

　　5.1 治疗子宫出血　100例使用宫内节育器后的妇女服用断血流颗粒,月经量减少95例,无效5例。未服断血流颗粒的100例妇女中有效70例,无效30例。分析认为断血流颗粒减少月经量的机制可能与减少子宫内膜的各种生化介质如纤溶原激活物、前列腺素和溶酶体等的释放有关。口服米索后服用复方断血流胶囊组与不服复方断血流胶囊组比较流产效果、转经时间(月经恢复的平均天数) 、胚囊排出的平均时间无显著差异,而两组比较阴道出血时间、阴道出血量少于自身月经量或相似的患者比例、12～24h胚囊排出时间等均有显著性差异。米非司酮、米索前列醇配伍断血流胶囊用于终止早孕可明显减少出血量。服用断血流片的49例功能性子宫出血患者中有效39例,服用安络血片的20例患者中仅4例有效。说明断血流片治疗功能性子宫出血有良好疗效。

　　5.2 治疗血友病　服用荫风轮片可治疗血友病,防止或减少出血。

　　5.3 治疗宫外孕　有人试用单味断血流(荫风轮)治疗宫外孕取得了较好效果,开创了单味草药治疗宫外孕的先例。

　　5.4 治疗其他疾病　断血流片对遗传性毛细管扩张、过敏性紫癜、单纯性紫癜等病症也有较好的疗效。民间还用断血流治疗感冒头痛、乳腺炎、痢疾、荨麻疹、过敏性皮炎、黄胆型肝炎、胆囊炎等症。

　　5.5 不良反应　少数患者有轻度恶心、腹泻现象,但减量或停药后即愈,无其它不良反应。

　　6 结论与讨论
　　断血流原植物定性分析,表明其中含有黄酮、皂苷、氨基酸、多糖、酚性成分和挥发油等,且具有生理活性多样性。目前研究主要集中于断血流皂苷及其药理作用上,缺乏一个连续的综合研究体系。笔者认为,考虑到断血流的药用发展前景,应对以下内容进行深入研究。
　　(1)化学成分及其药理作用方面,提取单一有效成分,进行定性定量研究,并确定其作用机制;
　　(2)药材种植方面,按照GAP规范种植的研究;
　　(3)质量控制方面,运用新的研究技术建立完善的断血流中药指纹图谱,统一控制断血流提取物的质量标准;
　　(4)剂型和药效方面:初步调研发现目前断血流制剂品种多达12种,包括片、胶囊、颗粒剂、口服液、糖衣片、薄膜衣片、分散片、滴丸、泡腾片、口崩片、软胶囊、胶丸等,应对各种剂型与药效的关系进行研究,以便为临床正确用药提供帮助;
　　(5)开展与本品相关的药物经济学方面的研究。